首页 公司简介 产品展示 热卖产品 公司新闻 技术文章 人才招聘 资料下载 联系我们
产品搜索
主营产品: ELISA试剂盒、生化试剂、重组蛋白、细胞因子、抗体、中药对照品。
服务电话
400-002-6926
15900443528
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
产品目录 更多...
酶联免疫检测(ELISA)试剂盒
实验室耗材
 
 
推荐产品 更多...
48T/96T人葡萄糖激酶(GCK)ELISA kit
48T/96T人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)ELISA kit
48T/96T人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA kit
48T/96T人胸苷酸合成酶(TS)ELISA kit
48T/96T人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA kit
 
 
联系我们
公司:上海瑶韵生物科技有限公司
联系人:黄先生
手机:15900443528、18917067275
电话:400-002-6926、86-021-34535391
传真:86-021-34535391
地址:上海闵行区绿莲路100弄
邮编:
网址:www.yaoyunbio.com
邮箱:912529879@qq.com
 
 
技术文章

大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒说明书


点击次数:1072 更新时间:2013-09-15

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
大鼠(Rat)乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA检测试剂盒使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预
先包被乙酰胆碱酯酶(AChE)抗体的包被微孔中,依次加入标本、
标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显
色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成
zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙酰胆碱酯酶(AChE)呈正相
关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞
刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地
分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟
取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于
-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的
浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解
后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0 的S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5 倍,zui终结果乘以5 才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无
标准品0.3mL*6 管0.3mL*6 管无
样本稀释液6mL 3mL 无
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
底物B 6mL 3mL 无
终止液6mL 3mL 无
封板膜2 张2 张无
说明书1 份1 份无
自封袋1 个1 个无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、12.5、25、50、100、200 nmol/L
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20 稀释,即1 份的20×洗涤缓
冲液加19 份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min 后甩尽
孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5 次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封
袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不
加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶
(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴
锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去
洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min 内,在450nm 波长处测定各孔的
OD 值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应
OD 值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样
本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值,大于等于
0.9900。
2. 灵敏度:zui低检测浓度小于1.0 nmol/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所
产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者
承担。

 
 
 
首页 | 公司简介 | 产品展示 | 热卖产品 | 公司新闻 | 技术文章 | 人才招聘 | 资料下载 | 联系我们
上海瑶韵生物科技有限公司 版权所有 地址:上海闵行区绿莲路100弄
联系人:黄先生 电话:400-002-6926、86-021-34535391 手机:15900443528、18917067275 传真:86-021-34535391 邮编: 邮箱:912529879@qq.com
技术支持:智慧城市网 管理登陆 ICP备案号:沪ICP备13007406号-1

智慧城市网

推荐收藏该企业网站