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技术文章

小鼠天门冬酰胺酶(Asparaginase)ELISA检测试剂盒说明书


点击次数:1076 更新时间:2013-09-25

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被天门冬酰胺酶(Asparaginase)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的天门冬酰胺酶(Asparaginase)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品活性。

样品收集、处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1.       酶标仪(450nm

2.       高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3.       37℃恒温箱

操作注意事项

1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中