首页 公司简介 产品展示 热卖产品 公司新闻 技术文章 人才招聘 资料下载 联系我们
产品搜索
主营产品: ELISA试剂盒、生化试剂、重组蛋白、细胞因子、抗体、中药对照品。
服务电话
400-002-6926
15900443528
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
产品目录 更多...
酶联免疫检测(ELISA)试剂盒
实验室耗材
 
 
推荐产品 更多...
48T/96T人葡萄糖激酶(GCK)ELISA kit
48T/96T人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)ELISA kit
48T/96T人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA kit
48T/96T人胸苷酸合成酶(TS)ELISA kit
48T/96T人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA kit
 
 
联系我们
公司:上海瑶韵生物科技有限公司
联系人:黄先生
手机:15900443528、18917067275
电话:400-002-6926、86-021-34535391
传真:86-021-34535391
地址:上海闵行区绿莲路100弄
邮编:
网址:www.yaoyunbio.com
邮箱:912529879@qq.com
 
 
技术文章

人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)ELISA试剂盒说明书


点击次数:1299 发布时间:2014-08-03

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断

检测原理

试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人庚型肝炎病毒的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗原,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)的存在与否。

样品收集、处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

  1. 酶标仪(450nm)
  2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  3. 37℃恒温箱

操作注意事项

  1.   试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
  2.   实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
  3.   预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的*检测效果。
  4.   严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
  5.   所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

阴性对照

0.5mL

0.5mL

阳性对照

0.5mL

0.5mL

检测抗原-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

样本稀释液

6mL

3mL

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

说明书

1

1

自封袋

1

1

 

试剂的准备

 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

  1.   手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
  2.   自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步骤

  1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2.   设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;
  3.   待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
  4.   随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

 1.  试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;

                阴性对照孔OD值平均值≤0.15。

2.  临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

3.  阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性

4.  阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性

试剂盒性能

1.  准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。

2.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

4.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

5.  有效期:6个月

免责声明

1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

 
 
 
首页 | 公司简介 | 产品展示 | 热卖产品 | 公司新闻 | 技术文章 | 人才招聘 | 资料下载 | 联系我们
上海瑶韵生物科技有限公司 版权所有 地址:上海闵行区绿莲路100弄
联系人:黄先生 电话:400-002-6926、86-021-34535391 手机:15900443528、18917067275 传真:86-021-34535391 邮编: 邮箱:912529879@qq.com
技术支持:安防展览网 管理登陆 ICP备案号:沪ICP备13007406号-1

安防展览网

推荐收藏该企业网站